Megazyme試劑盒抗性淀粉的測定方法
發(fā)布日期:2022-02-23 點(diǎn)擊:1135
Megazyme試劑盒用于分析a-葡聚糖(包括淀粉,糖原,植物糖原和非抗性麥芽糊精),一個樣品溶液的重復(fù)測定中,吸收值會有0.005至0.010的波動。當(dāng)樣品體積為1ml時,這相當(dāng)于0.05-1ml/L濃度的D-葡萄糖。如果樣品在準(zhǔn)備過程中被稀釋,結(jié)果需要乘以稀釋倍數(shù)。例如在樣品準(zhǔn)備時,樣品稱重,如10g/L,變異范圍將在0.02至0.05g/100g。
抗性淀粉的測定方法:樣品使用淀粉葡糖苷酶(AMG)37℃振蕩水浴孵育16小時,在這期間,通過兩種酶的聯(lián)合作用,非抗性淀粉被溶解,水解成D-葡萄糖,孵育結(jié)束后,終止反應(yīng)。離心上述溶液,收集上清勿棄,底部殘留絮狀團(tuán)即為樣品中的RS,用含水的IMS洗滌絮狀團(tuán),洗滌后離心,再重復(fù)一次洗滌離心,收集離心后獲得的上清,與之前收集的上清混合。D-葡萄糖用葡糖氧化酶/過氧化物酶試劑測定,這也是對樣品中RS含量的測定,非抗性淀粉(可溶性淀粉)的測定可通過集中的上清液并定容至100mL,再用GOPOD測定D-葡萄糖完成。
Megazyme試劑盒檢測原理:洗滌后離心,再重復(fù)一次洗滌離心,收集離心后獲得的上清,與之前收集的上清混合。小心倒出試管殘留的液體,將絮狀團(tuán)置于冰水浴中,加入2MKOH溶解,邊溶解邊用磁力攪拌機(jī)劇烈攪拌。用醋酸鹽緩沖液將溶液調(diào)至中性,用AMG將淀粉定量水解為葡萄糖。D-葡萄糖用葡糖氧化酶/過氧化物酶試劑(GOPOD)測定,這也是對樣品中RS含量的測定。