teknova培養(yǎng)基滅菌效果下降的6大因素分析
發(fā)布日期:2022-03-28 點擊:1143
teknova培養(yǎng)基是結合解剖,生物化學和免疫學方法鑒定組織切片中特異性抗原-抗體相互作用的技術,以各種格式使用,但所有方法都涉及兩個步驟:樣品制備和標簽。
培養(yǎng)基用于基礎研究,以了解生物組織不同部位細胞標志物和差異表達蛋白質的分布,用于異常細胞的染色,如在癌性腫瘤中,細胞增殖和細胞死亡(凋亡和壞死)的特異性標志物的染色。
樣品制備對于抗體-抗原相互作用的可視化至關重要,保持細胞形態(tài),包括下面的組織結構并且還維持靶抗原的表位的方式來制備樣品。固定用于保存組織,常見的試劑包括甲醛,多聚甲醛和戊二醛,它們都在不同程度上作用于蛋白質中的可逆交聯(lián)共價鍵,但是這種固定有時會導致表位的掩蔽。因此,固定方案基于用于檢測的組織和抗體進行實驗確定和優(yōu)化。
造成teknova培養(yǎng)基滅菌效果下降的6大因素分析:
影響培養(yǎng)基滅菌效果的因素除滅菌溫度和時間外還有培養(yǎng)基的成分和物理狀態(tài)、PH、微生物數(shù)量、微生物細胞含水量、微生物細胞菌齡和耐熱性、蒸汽中空氣的排除情況、攪拌和泡沫等。
1、營養(yǎng)成分的保持:濕熱滅菌時,微生物被殺死的同時,培養(yǎng)基的營養(yǎng)成分也遭到了一定的破壞,特別是氨基酸和維生素。如在121℃,僅20min,就有59%的賴氨酸及其他堿性氨基酸被破壞,蛋氨酸也有相當數(shù)量被破壞。在熱的作用下某些營養(yǎng)成分還可能因受熱而相互之間發(fā)生反應,造成培養(yǎng)基中原有營養(yǎng)成分的數(shù)量變化,因而影響培養(yǎng)基質量。
2、微生物的耐熱性:細菌芽孢的熱阻較大,滅菌所需要的時間取決于把細菌芽孢減少到所規(guī)定數(shù)目的時間。
3、pH值:對微生物的耐熱性影響很大。
4、培養(yǎng)基成分:油脂、糖類及蛋白質等組成的高濃度有機物會包于細胞的周圍形式一層薄膜、影響熱的傳導。而高濃度的鹽類、色素則削弱其耐熱性,滅菌較易。
5、泡沫:泡沫中的空氣形成隔熱層,使熱量難以滲透進去,殺死其中的雜菌。
6、顆粒:顆粒小,容易滅菌,顆粒大,則難滅菌。