Institute細(xì)胞的使用方法介紹
發(fā)布日期:2020-08-19 點(diǎn)擊:1741
Institute細(xì)胞要要想在培養(yǎng)基中生長,便要創(chuàng)造細(xì)胞能夠生長的緩沖系統(tǒng)。細(xì)胞較脆弱一旦暴露在不適宜的環(huán)境中便會立馬死亡。
在對培養(yǎng)基的環(huán)境進(jìn)行調(diào)試的時候,要做成一套緩沖系統(tǒng),能夠在方方面面照顧到細(xì)胞的成長,在細(xì)胞培養(yǎng)基中接入碳酸氫鈉讓其與空氣中的二氧化碳平衡,設(shè)置一定量的培養(yǎng)液,讓細(xì)胞正常的成長。并且在培養(yǎng)的過程中,不要把細(xì)胞培養(yǎng)基的蓋得太緊,以免造成氧氣的缺失,影響細(xì)胞的活性。
使用方法
Institute細(xì)胞是一種高度分化細(xì)胞,屬于不增殖細(xì)胞群,不能增殖和傳代,只能進(jìn)行原代培養(yǎng)且存活時間較短。取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
吸出細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,添加0.25%胰蛋白酶消化液1mL至培養(yǎng)瓶中,輕微轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個培養(yǎng)瓶底后,吸出多余胰蛋白酶消化液,37℃溫浴1-3min;倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后,再加入5ml*培養(yǎng)基終止消化。
用吸管輕輕吹打混勻、分散細(xì)胞,置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng);待細(xì)胞*貼壁后,培養(yǎng)觀察;之后每隔2-3天更換新鮮的*培養(yǎng)基。